小鼠乳汁中重组人乳铁蛋白的提取与抗菌活性的研究
缪明星,柏亚军,安礼友,周咏松,郭磊,袁玉国,成勇
扬州大学兽医学院外产科教研室
Study on Purification and Antibacterial Activity of Recombinant Human Lactoferrin in Milk of Transgenic Mice
摘要 本研究从人乳铁蛋白（hLF）cDNA转基因小鼠乳汁中提取重组人乳铁蛋白（rhLF），并用提取的rhLF进行抗菌活性分析。收集了2个基因和2个品系的（PCL25和AP基因）转基因小鼠乳汁，采用凝胶过滤层析法从转基因小鼠乳汗中提取rhLF，提取物通过SDS-PAGE电泳及Western-blotting分析，ELISA检测提取物中rhLF含量；按不同浓度rhLF作琼脂扩散抑制大肠杆菌、沙门氏菌试验。结果表明，通过凝胶过滤层析获得的PCl25和AP转基因小鼠乳汁中的rhLF分子量为78KDa，与天然人乳铁蛋白一致，rhLF对大肠杆菌、沙门氏菌均具有明显的抑菌作用。
Abstract ：In this paper, to confirm the bacteriostatic properties， the recombinant human lactoferrin (rhLF) was extracted form the milk of transgenic mice by gel filtration chromatography. The rhLF was also analyzed by SDS-PAGE and ELISA-assay. The bacteriostatic properties of rhLF was tested by agar disc diffusion method and direct counting method. The results showed that the molecular weights of rhLF, both of proteins from the transgenic mice of PCL25 and AP vectors were compared with that of native hLF, and were about 78 KDa. The rhLFs have significant bacteriostatic properties against E.coli and Samonella.
收稿日期: 2008-08-04
通讯作者:
缪明星
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