玫瑰黄链霉菌几丁质酶基因克隆及拼接表达
刘力强;张维宏;李亚宁;杨文香;刘大群
Cloning and splicing expression in Escherchia coli
摘要 应用PCR扩增到得到玫瑰黄链霉菌S. roseoflavus的几丁质酶基因的整个催化域,将其与包含信号肽区、纤维素结合区、几丁质结合区三个结构功能域的S. lividans chiC基因片段相连接,插入pET23b (+)质粒上,构建成表达载体,用来转化大肠杆菌JM109(DE3),转化子在几丁质酶培养基上表现活性。
关键词 :
链霉菌 ,
几丁质酶 ,
克隆 ,
表达
Abstract :Getting the chitinase catalytic domain of Streptomyces roseoflavus by PCR, The catalytic domain was then connected with S. lividans chiC fragment which contains three domains (cellulose binding domain, chitin-binding domain, signal peptide domain). The fragment was cloned into pET23b(+). Then the recombinant plasmid pLCH was transformed into E. coli JM109(DE3). The transformat was induced expressing with IPTG. Its chitinase activity was be found on the chitin culture medium.
Key words :
Streptomyces
Chitinase
Cloning
Expression
收稿日期: 2006-03-28
通讯作者:
刘大群
[1]
周琪, 冯燕茹, 李嵩, 刘子辉, 郑炜君, 柴守诚. 小麦TaXTH -7A 基因的克隆及抗旱性鉴定 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(9): 1521-1532.
[2]
韦小英, 何卓远, 雷豆, 苏周, 吴雨, 杨军, 邹建. 向日葵MADS-box家族基因HaTrans6 的克隆及表达分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(9): 1560-1568.
[3]
秦文昌, 殷实, 熊显荣, 王斌, 黄向月, 周婧雯, 李键. 牦牛KDM1B 基因CDS区克隆及其在不同组织和卵母细胞成熟过程中的表达 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(9): 1604-1613.
[4]
陈兰, 张涛, 王金玉, 殷学梅, 陈福祥, 张跟喜, 韦习会, 冒静. 金茅黑鸡GAS6 基因的组织分布及其在脂肪组织中的发育性表达 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(9): 1637-1643.
[5]
包世俊, 丁小琴, 邢小勇, 薛慧文, 伏小平, 武小椿, 温峰琴. 滑液支原体WVU1853株pdhA 、pdhB 的原核共表达及表达产物酶活性分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(9): 1673-1680.
[6]
杨鹤, 岳武成, 侯鑫, 王军, 陈晓雯, 吴嘉敏, 王成辉. 中华绒螯蟹血细胞的原代培养及其管家基因检测 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(9): 1703-1710.
[7]
杨晗, 李岩, 申长卫, 金雨濛, 石晓倩, 谢昶琰, 梅新兰, 徐阳春, 董彩霞. 梨钾通道基因PbAKT1 的克隆及其表达分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(8): 1341-1350.
[8]
凌秋平, 吴嘉云, 杨湛端, 周文灵, 黄莹, 李奇伟, 曾巧英. 甘蔗SsCBL4 基因的克隆及表达特性分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(8): 1351-1359.
[9]
朱晓锋, 许厚强, 陈伟, 谌颖莲, 倪锴, 吴小敏, 倪萌萌, 卢贤君. 从江香猪IGF -1 和IGF -2 基因的克隆、表达及生物信息学分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(8): 1382-1391.
[10]
潘坛, 吕明, 罗军, 李聪. 西农萨能奶山羊TRIB3 基因克隆及RNA干扰分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(8): 1392-1400.
[11]
李华振, 狄冉, 郭晓飞, 张金龙, 张效生, 马琳, 储明星, 刘武军. 绵羊繁殖轴相关组织RXRs基因的表达及RXRA 基因多态性与季节性发情之间的关系 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(8): 1401-1409.
[12]
杜菲, 易治鑫, 于海莹, 张燕, 李慧敏, 杨莉, 王钰曾, 姜冬梅, 康波. 精胺对雌鹅十二指肠多胺代谢关键基因表达及多胺含量的影响 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(8): 1445-1451.
[13]
王雯, 包世俊, 邢小勇, 胡荣斌, 丁小琴, 伏小平, 薛慧文. PPRV武威分离株N 基因的原核表达及免疫原性分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(8): 1478-1484.
[14]
申威, 姚文孔, 郑巧玲, 张宁波, 徐伟荣. 山葡萄VaCBL01 基因克隆及其与VaCIPKs蛋白互作分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(7): 1149-1160.
[15]
李东亮, 王彩香, 赵阁, 肖钰, 葛晓阳, 李付广, 杨青华. 棉花GhJAZ10 基因的克隆及其对干旱胁迫的响应 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(7): 1179-1189.