GatewayTM系统快速构建番木瓜环斑病毒CP和CI基因的反向重复序列表达载体1
姜玲
华中农业大学园艺林学学院 国家果树脱毒种质资源室内保存中心 教育部植物生物学重点实验室
Quick Construction of Inverted Repeat Vector of Papaya Ringspot Virus CP and CI Genes by GatewayTM System
摘要 本试验设计了含有attB侧翼序列的引物用于番木瓜环斑病毒的外壳蛋白基因（CP）和运动蛋白基因（CI）扩增。在BP重组酶的作用下，将CP基因和CI基因分别与受体载体pDONRTM221发生重组反应，产生入门克隆。接着，在LR重组酶作用下，将入门克隆与目的载体pHellsgate12发生重组反应，通过平板培养筛选及PCR扩增和酶切反应，获得了含CP基因和CI基因反向重复序列的表达载体。
Abstract ：In this experiment, we designed attB-flanked PCR primers and amplified coat protein gene (CP) and movement protein gene (CI) genes of Papaya ringspot virus with PCR, performed a BP recombination reaction with attB-PCR products and donor vector pDONRTM221 to generate an entry clone, then, processed an LR recombination reaction with the entry clone and destination vector pHellsgate12 of select to generate an expression clone system by screening of plate medium, and detected with PCR and enzyme digestion.
收稿日期: 2007-06-22
通讯作者:
姜玲
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