甘蓝型油菜中黑芥子酶基因在大肠杆菌中重组质粒的构建和表达
肖海燕 王向阳
浙江工商大学食品生物与环境工程学院 浙江工商大学食品生物与环境工程学院
Construction and Expression of a Brassica napus Myrosinase in Escherichia coli
摘要 实验通过RT-PCR程序从提取的油菜总RNA中扩增出硫代葡萄糖苷水解酶（又称黑芥子酶，EC3.2.1.147）基因,酶解后插入大肠杆菌表达载体（Escherichia coli）pGEX-4T-1，获得克隆菌株。基因测序在 GenBank中的登陆号为EF583560，翻译的氨基酸序列与已报道的黑芥子酶（GenBank中的登陆号为Q00326）中的一段有一个氨基酸不同，同源性达到99%。经过IPTG诱导表达，在91KDa左右处有表达量很高的一条带。
关键词 ：
硫代葡萄糖苷水解酶 ,
克隆 ,
诱导表达
Abstract ：The myrosinase gene was amplified from total RNA by RT-PCR and inserted into Escherichia coli expression vector pGEX-4T-1.The result of sequencing was EF583560 in GenBank.The amino acid sequence showed that the homology was 99% comparing with a length of published amino acid sequence of Q00326.The recombinant protein was highly expressed at 91KDa by IPTG induced in Escherichia coli.
Key words ：
Thioglucoside glucohydrolase/myrosinase
Clone
Induced expression
收稿日期: 2007-10-11
通讯作者:
肖海燕
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