枯草杆菌β-甘露聚糖酶基因的克隆及表达
毛绍名 章怀云 张学文
中南林业科技大学生命科学与技术学院 中南林业科技大学 湖南农业大学
Cloning and expression of β-mannanase gene from Bacillus subtilis
摘要 以能水解魔芋葡甘聚糖的野生筛选菌种枯草杆菌A33为材料，通过PCR技术从A33基因组中扩增出β-甘露聚糖酶基因编码序列。经过克隆、测序及BLAST比对分析，证实该基因编码β-甘露聚糖酶，属于β-甘露聚糖酶家族中的一员。该基因已注册GenBank（GenBank注册号：DQ269473）。将该基因构建到大肠杆菌表达载体pET-32a并转入大肠杆菌表达系统BL21（DE3），经过诱导获得了此酶的高效表达.
关键词 ：
β-甘露聚糖酶 ,
基因克隆 ,
表达
Abstract ：A selected strain of Bacillus subtilis A33 which can hydrolysis the glucomannan of Amorphophallus is used as material to isolate the full-length gene of β-mannanase by PCR. Sequence analysis show this DNA fragment encodes β-mannanase which belongs to the family of mannanase.This Sequence had was submitted in GenBank（GenBank Accession：DQ269473）.To express it in E. coli it is recombinant into the high efficiency expressive vector pET-32a and a recombinant plasmid pET-32a-ManA is constructed and transformed into strain E. coli BL21（DE3）.β-mannanase is expressed efficiently after inducing.
Key words ：
β-Mannanase
Gene Clone
Expression
收稿日期: 2006-06-05
通讯作者:
毛绍名
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