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新型鸭呼肠孤病毒RT-PCR方法的建立与应用
王劭1,陈少莺1,陈仕龙2,程晓霞2,林锋强2,朱小丽2,江斌3,李兆龙3
1. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所动物病毒室
2.
3. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所
Establishment and Its Application of RT-PCR for Detection of Novel duck reovirus
全文: PDF (1097 KB)   HTML (1 KB) 
输出: BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 研究建立检测新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)的RT-PCR 方法,并运用建立的检测方法对分离毒与人工感染样品进行应用检测。根据NDRV-NP03株S3基因全序列(NDRV-NP03,GenBank登录号:GQ888710),设计合成了一对引物, 以NDRV分离株为模板, 建立了检测NDRV的RT-PCR方法。结果显示:该方法仅能从NDRV分离毒中扩增到与预期大小相符长度为586 bp的特异性目的片段,检测灵敏度达到2 pg病毒RNA,而其它病毒,番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus, MDRV)、禽呼肠孤病毒(Avian reovirus, ARV)、鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)、番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus, MDPV)、鹅细小病毒(Goose parvovirus, GPV)、鸭副粘病毒(Duck paramyxovirus, DPMV)、鸭病毒性肝炎病毒(Duck hepatitis virus, DHV)等样品的扩增结果均为阴性。应用该方法对8株NDRV分离毒和3份人工感染鸭肝脾组织进行检测均为阳性。表明建立的RT-PCR方法特异性强、敏感度高,可用于NDRV的临床诊断和流行病学调查。
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作者相关文章
王劭
陈少莺
陈仕龙
程晓霞
林锋强
朱小丽
江斌
李兆龙
关键词 新型鸭呼肠孤病毒RT-PCR检测    
Abstract:To develop a RT-PCR assay for the detection of novel duck reovirus(NDRV) and apply the developed assay to isolated strains and artificial infected samples, according to NDRV-NP03 S3 gene in the GenBank(GenBank:GQ888710), a pair of primers for amplying NDRV specifical fragment were designed and synthesized.RT-PCR technique detecting the RNA of NDRV was constructed.RT-PCR results showed that a 586 bp specifical fragment could be isolated only from the NDRV-NP03 strain RNA, and the sensitivity of RT-PCR reached to 2 pg NDRV-RNA.And the negative results were achieved from the other viruses, Muscovy duck reovirus(MDRV), Avian reovirus(ARV), Infectious bursal disease virus(IBDV), Muscovy duck parvovirus(MDPV), Goose parvovirus(GPV), Duck paramyxovirus(DPMV) and Duck hepatitis virus(DHV). The positive rate of RT-PCR method for detecting viral pathogens in 8 field NDRV isolates and 3 samples of the liver and spleen tissues of ducklings which were artificially infected by the strain of NDRV-NP03 was 100%. The results indicate that this RT-PCR method is sensitive and specific for detecting NDRV, and can be used in NDRV clinical diagnosis and epidemiology investigation.
Key wordsnovel duck reovirus    RT-PCR    detection
收稿日期: 2010-07-27     
通讯作者: 陈少莺   
引用本文:   
王劭1,陈少莺1,陈仕龙2,程晓霞2,林锋强2,朱小丽2,江斌3,李兆龙3. 新型鸭呼肠孤病毒RT-PCR方法的建立与应用[J]. , 2011, 19(2): 388-392.
链接本文:  
http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/     或     http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/Y2011/V19/I2/388
 
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