水牛γ-干扰素单克隆抗体的制备及其特性分析
徐贤坤1 ,熊毅2
1. 广西动物疫病预防控制中心
Preparation and Analysis of Monoclonal Antibodies against Water Buffalo Interferon-gamma
摘要 将原核表达的重组水牛γ-干扰素成熟蛋白（rGST-BoIFN-γ）以100μg/只剂量免疫8周龄Balb/c小鼠，经5次免疫后，取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，以rHIS-BoIFN-γ蛋白作为检测抗原进行间接ELISA检测，筛选并最终得到了2株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株，分泌抗体亚型为IgG1型，轻链为κ链，分别命名为1E4株，4A11株。Western-blot检测显示：2株单克隆抗体与原核表达rHIS-BoIFN-γ蛋白均具有良好的免疫反应原性。将2株单抗进行抗体配对分析，表明其能识别不同的抗原表位，可配对用于抗原检测。
关键词 ：
γ-干扰素 ,
水牛 ,
单克隆抗体 ,
BALB/c
Abstract ：BALB/c mice(Mus musculus) were immunized five times with purified recombinant rGST-BoIFN-γ protein expressed in E.coli BL21(DE3) at 100μg per mice. Murine myeloma cells were fused with splenocytes of the immunized mice. An indirect ELISA with recombinant rHIS-BoIFN-γas antigen was used to screen antibody-producing hybridomas. Two hybridomas cells could produce McAbs steadily after 3 cycles of subcloning, all McAbs showed positive reaction to rHIS-BoIFN-γ in western blot. All McAbs were IgG1 isotype and κ chain. The two McAbs can be partner for detect antigen.
Key words ：
IFN-γ
water buffalo
McAb
BALB/c
收稿日期: 2009-04-09
通讯作者:
徐贤坤
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