串联抑制素基因克隆与重组质粒的构建
曹学亮 焦硕
中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所畜牧研究室,山东德州学院农学系畜牧研究室 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所畜牧研究室
The Tandem Inhibin Gene Cloning and the Recombinant Plasmid Constructing
摘要 根据GenBank中报道的猪抑制素基因序列设计两对引物,克隆含有抑制素抗原决定簇基因片段α(1~32)的p1INH和p2INH,在这两个片段中都设有限制性内切酶XbaⅠ的酶切位点,通过XbaⅠ把p1INH与p2INH串联起来。串联抑制素基因片段与pcDNA3.1载体通过EcoRⅠ、HindⅢ酶切位点连接后经过转化DH5α感受态细菌构建重组载体。以重组载体作为模板,以含有EcoRⅠ、HindⅢ酶切位点的引物PCR,产物经验证为含串联的抑制素基因。串联的抑制素基因产生的融合蛋白具有抑制素的免疫原性,也不会与体内其他蛋白发生免疫交叉反应。串联后的基因片段在单位体积内的抗原位点数增多,免疫效果也会加强。可以反馈性地抑制FSH的分泌,提高母畜的排卵数,提高产仔数。
关键词 :
串联 ,
抑制素 ,
基因克隆 ,
重组质粒
Abstract :In order to cloning the tandem inhibin gene, the two different primers were desigened according to the Genbank sequence. p1INH and p2INH were Tandem through XbaⅠ. Doubled gene encoding porcine inhibinα(1~32) was cloned and recombined with pcDNA3.1 expression vector to construct inhibin gene vaccine pcINH. The recombinant plasmid pcINH was expressed in E. coli. DH5α.The expression protein had inhibin immunization activity and has no homology with other protein in the body.
Key words :
Tandem Inhibin
Gene Cloning
Gene cloning
Recombinant Plasmid
收稿日期: 2006-12-20
通讯作者:
曹学亮
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