大白菜BrWRKY33基因上游调控序列的克隆及其功能研究
范荣伟1 ,2 ,谢华3 ,姚磊3 ,马荣才1
1. 北京农业生物技术研究中心 2. 首都师范大学 3.
Cloning and Expression Analysis of the Up-stream Regulatory Sequence of Transcription Factor Gene BrWRKY33 from Chinese Cabbage
摘要 摘 要 根据大白菜EST和基因组序列,利用PCR技术从大白菜品种龙白二号(Brassica rapa subp. pekinensis cv. Longbai Ⅱ)基因组中克隆转录因子基因BrWRKY33起始密码子上游大小1 755 bp的调控序列。然后,构建5'端缺失突变体,与gus基因融合,构建植物表达载体。将载体转化拟南芥(Arabidopsis thaliana) 哥伦比亚生态型(Columbia ecotype),进行植物组织GUS化学染色分析。结果表明,BrWRKY33密码子上游-1 755~-315区域存在的多个W-box元件可能与该基因表达的负调控相关,-315 bp区域含有BrWRKY33基因转录必需的基本元件。对接种软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora subsp. carotovora)后不同时期的植株进行染色,发现该病原菌侵染使转基因植株gus基因表达量增加,表明BrWRKY33基因在植物对软腐病抗性反应中具有一定的作用。
关键词 :
大白菜 ,
BrWRKY33 ,
上游调控序列 ,
转录因子 ,
软腐病
Abstract :Abstract An 1 755 bp up-stream regulatory sequence of the transcription factor gene BrWRKY33 was cloned from Chinese cabbage (Brassica rapa subp. pekinensis cv. LongbaiⅡ). Two 5' deletion mutants of the sequence were fused with the reporter gene gus, respectively, and transformed into Arabidopsis thaliana. The results indicated that the W-box sequences present in -1 755~-315 bp region of BrWRKY33 was related to the down regulation, and the 0~-315 bp region contained the essential sequence for gene transcription. Transgenic plants challenged with soft rot bacteria (Erwinia carotovora subsp. carotovora) showed an increase in gus activity, indicating that BrWRKY33 gene play a role in the resistance against soft rot disease.
Key words :
Chinese cabbage
BrWRKY33
up-stream regulatory sequence
transcriptional factor
soft rot
收稿日期: 2009-04-07
通讯作者:
马荣才
[1]
黄玉兰, 岳才军, 韩毅强, 王景伟, 王丽艳, 贾桂燕, 孙丽芳. 烯效唑对低温胁迫下薏苡幼苗光合特性及相关转录因子基因表达的影响 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(8): 1360-1368.
[2]
杨韩, 张阳海, 王敏, 康雨欣, 朱海鲸, 蓝贤勇, 屈雷, 闫海龙, 潘传英. 陕北白绒山羊POU1F1 基因3'-UTR多态性及其与生长性状的相关分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(7): 1224-1232.
[3]
陈昌龙, 赵雪, 孙旺旺, 李晓颖, 田宇, 李未然, 谢华. 大白菜软腐病抗性相关基因分子标记的开发 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(6): 982-992.
[4]
王庆竹, 尚先文, 汤纬玮, 李慧平, 文晓鹏, 范付华. 马尾松PmWRKY164 基因的克隆及耐低磷功能分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(6): 1016-1024.
[5]
王立国, 傅明川, 李浩, 刘任重, 柳展基. 陆地棉NAC转录因子基因GhSNAC1 的克隆及其抗旱耐盐分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(4): 571-580.
[6]
盛宇欣, 彭疑芳, 朱星宇, 金峰, 孔稳稳, 李晶. 拟南芥吲哚族芥子油苷合成调控基因表达模式的分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(4): 606-614.
[7]
雷梦林, 毛新国, 昌小平, 刘霞, 景蕊莲. 小麦TaDREB1 的功能标记作图和表达特性分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(2): 229-236.
[8]
贾慧, 张泽雪, 刘宁, 孟庆江, 曹志艳, 董金皋. 玉米大斑病菌转录因子StMR1的结构特征及其表达模式分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(10): 1720-1728.
[9]
万雪丽, 冯依, 刘庆华, 王奎玲. 香石竹DcHsfA4 基因克隆及表达特性分析 [J]. 农业生物技术学报, 2019, 27(10): 1751-1760.
[10]
丁谦 宋晴晴 杨发斌 李景娟 李化银 张一卉 王凤德 高建伟. 植物ANT类转录因子研究进展 [J]. , 2018, 26(9): 1601-1610.
[11]
周美琪 李帅 叶子弘 张雅芬 俞晓平 赵金兰 崔海峰. 菰ZlWRKY72转录因子克隆及其在茎部膨大发育中的表达分析 [J]. , 2018, 26(6): 920-930.
[12]
刘小辉 周荣艳 张传生 彭永东 李祥龙. 坝上长尾鸡TYR基因核心启动子鉴定与单核苷酸多态性分析 [J]. , 2018, 26(6): 959-969.
[13]
周迪 许厚强 陈伟 赵佳福 段志强. 地方黄牛MyoD1基因启动子多态性分析及其相关转录因子SF1验证 [J]. , 2018, 26(5): 743-755.
[14]
朱守晶 史文娟 揭雨成 周清明. 苎麻镉响应转录因子BnMYB1的克隆和表达分析 [J]. , 2018, 26(5): 774-783.
[15]
刘栓桃 张志刚 王立华 王荣花 李巧云 陈伟 赵智中 张全芳 梁水美 王淑芬. 主要大白菜品种及种质资源在eIF(iso)4E.a和eIF(iso)4E.c位点的基因型精准鉴定 [J]. , 2018, 26(5): 888-898.