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2025年8月4日 星期一
  2017, Vol. 25 Issue (5): 820-826    
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大菱鲆脑细胞系的建立
张念伟1,刘肖峰2,王娜2,郭华2,马佳璐2,陈松林3
1. 中国水产科学研究院黄海水产研究所
2. 中国水产科学研究院 黄海水产研究所
3. 中国水产科学研究院
Establishment of a Brain Cell Line from Turbot (Scophthalmus maximus)
全文: PDF (5452 KB)   HTML (1 KB) 
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摘要 摘 要 鱼类细胞系作为一种重要的研究工具已经被广泛地应用于病毒学、环境毒理学、发育生物学以及生理学等研究中。大菱鲆(Scophthalmus maximus)作为一种重要的海水养殖鱼类,尚未见其脑细胞系建立的报道。本研究通过组织块法,以大菱鲆脑组织为材料,建立了大菱鲆脑细胞系(S. maximus brain cell line, SMB)。培养细胞系所用的培养基是在DMEM/F12基本培养基中添加了4-羟乙基哌嗪乙磺酸(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid, Hepes)、抗生素(青链霉素)、胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)和β-巯基乙醇(2- mercaptoethanol, 2-ME)所配成的完全培养基。SMB细胞由上皮样细胞和成纤维样细胞构成,生长分裂旺盛,至今已传40余代。探究温度对其生长的影响,结果表明,SMB细胞在18~30 ℃均能正常生长,最适生长温度为24 ℃。核型分析显示,SMB细胞出现了染色体非整倍性,正常二倍体核型(2n=44t)约占43%。通过脂质体转染法成功的将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)报告基因转入SMB细胞中,并成功地获得了表达,转染率约为30%。该细胞系的建立将为大菱鲆致病性病毒的感染机制、基因功能分析等研究提供新的实验材料。
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张念伟
刘肖峰
王娜
郭华
马佳璐
陈松林
关键词 大菱鲆大菱鲆脑细胞系生长核型    
Abstract:Abstract Fish cells are important tools for studying virology, immunology, genetics, and so on. Turbot (Scophthalmus maximus) is a widely cultivated marine fish species in Europe and China. However, no brain cell line has been developed so far. S. maximus brain cell line (SMB) was established by tissue block method from turbot brain in this research. The cell line was maintained in DMEM/F12 which was supplemented with 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid (Hepes), antibiotic (mycillin), fetal bovine serum (FBS), antibiotics, basic fibroblast growth factor (bFGF), and 2-mercaptoethanol (2-ME). The cultured SMB cells were composed of fibroblast-like cells and epithelial-like cells, and they had been subcultured for more than 40 passages. The cells grew well in the temperature 18~30 ℃, and the optimum growth temperature was 24 ℃. Chromosome analysis indicated that the passage 30 cells exhibited chromosomal aneuploidy, and 43% of the cells maintained a normal diploid chromosome number (2n=44t). When the SMB cells were successfully transfected with pEGFP-N3 plasmid, the transfection efficiency was up to about 30%. The SMB cell line will provide a new important experimental material to study the mechanisms of infective viruses and gene function analysis.
Key wordsTurbot    Scophthalmus maximus brain cell line (SMB)    Growth    Karyotype
收稿日期: 2016-12-26      出版日期: 2017-05-02
基金资助:国家自然科学基金项目;黄海水产研究所基本科研业务费项目资助;山东省泰山学者攀登计划专项
通讯作者: 陈松林     E-mail: chensl@ysfri.ac.cn
引用本文:   
张念伟 刘肖峰 王娜 郭华 马佳璐 陈松林. 大菱鲆脑细胞系的建立[J]. , 2017, 25(5): 820-826.
链接本文:  
http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/     或     http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/Y2017/V25/I5/820
 
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