联系我们 加入收藏
 
年期检索 高级检索
33
2025年5月9日 星期五
  研究论文 本期目录 | 过刊浏览 | 高级检索 |
利用外源基因侧翼序列扩增筛选纯合转基因植株
贾芝琪,张忠华,崔艳红,李颖,黄三文,杜永臣
中国农业科学院蔬菜花卉研究所
Screening Homozygous Transgenic Plants by Flanking Sequences Amplification of T-DNA in Tomatoes
全文: PDF (508 KB)   HTML (1 KB) 
输出: BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 摘要:传统的纯化外源基因的方法主要是通过多代自交,该方法耗时长,效率低。通过对转基因材料中外源基因T-DNA区域插入位点侧翼序列的分析,本文开发了筛选纯合转基因植株的新方法。首先,利用酶切连接接头的PCR方法,我们在番茄转基因植株中扩增外源基因Avr3a的两翼序列并测序;然后通过该序列设计的引物在转基因植株中验证,得到的两翼序列通过与SGN数据库比对分析,发现外源基因的插入位点有40bp的碱基缺失;最后利用侧翼序列和边界序列设计的引物,成功在转基因T1代植株中筛选出纯合单株,并在T2代进行了验证。
服务
把本文推荐给朋友
加入我的书架
加入引用管理器
E-mail Alert
RSS
作者相关文章
贾芝琪
张忠华
崔艳红
李颖
黄三文
杜永臣
关键词 转基因番茄侧翼序列扩增纯合植株筛选    
Abstract:Abstract: Traditional method of screening homozygous transgenic plants is several generations self-pollenation, this is a time consuming work and low efficiency. We created a new method by flanking sequences amplification of T-DNA insertion site to screen homozygous plants. Firstly, we using modified adaptor ligation PCR method amplified flanking sequences of T-DNA in tomato transgenic plants. Then flanking sequences were comfirmed by PCR analysis in transgenic plants. BLAST results in SGN database showed that T-DNA integration site lost 40 base pair. Finally, we screened out homozygous lines in T1 transgenic generation using flanking sequence primers and border sequence primers, and verified the results in T2 generation.
收稿日期: 2008-10-20     
通讯作者: 贾芝琪   
引用本文:   
贾芝琪,张忠华,崔艳红,李颖,黄三文,杜永臣. 利用外源基因侧翼序列扩增筛选纯合转基因植株[J]. , 2009, 17(5): 820-824.
链接本文:  
http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/     或     http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/Y2009/V17/I5/820
 
版权所有 © 2014 《农业生物技术学报》编辑部   京ICP备11035905号-3
地址:北京市海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室 邮编:100193
电话:010-62733684 传真:010-62731615 E-mail: nsjxb@cau.edu.cn