香石竹GA20-oxidase基因的克隆及RNA干扰载体的构建
金亮;孙振元;刘 芸;李天红
中国农业大学农学与生物技术学院果树系/北京市果树逆境生理与分子生物学重点开放实验室，北京100193
Cloning of Carnation GA20-oxidase Gene and Construction of Plant RNAi Vector
摘要 根据已发表的菠菜、烟草等植物GA 20-oxidase基因序列在保守区设计简并引物，通过RT-PCR和RACE的方法克隆了Marster香石竹（Dianthus caryophyllus L. cv. Marster）GA 20-oxidase基因的全长cDNA（1 179 bp），命名为Dc20ox。同源性分析表明该基因与其它作物上发表的GA 20-oxidase基因的氨基酸序列同源性为66%~75%。在此基础上选用同源性相对较高的400 bp DNA片段，构建了RNA干扰（RNAi）载体pART400。
关键词 ：
香石竹 ,
GA 20-oxidase基因 ,
RNAi
Abstract ：A pair of degenerate primers were designed based on the conserved domain of the GA 20-oxidase reported in other plants. A full-length cDNA (1 179 bp) of carnation (Dianthus caryophyllus L. cv. Marster) GA20-oxidase named Dc20ox was cloned by RT-PCR and RACE methods. The deduced amino acids of this sequence shared a high homology. Blast showed that the amino acids sequence presented a high homology (66%~75%) with the GA20-oxidase in other plants. A RNAi vector (pART400) was constructed by a high homology 400 bp fragment.
Key words ：
carnation
GA 20-oxidase gene
RNAi
收稿日期: 2008-04-02
通讯作者:
李天红
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