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口蹄疫病毒3D蛋白在T4噬菌体衣壳表面的展示
覃健萍 徐维加 陈峰 马静云 谢青梅 姚兵华 曹永长 毕英佐
华南农业大学动物科学学院 云南出入境检验检疫局 华南农业大学动物科学学院 华南农业大学动物科学学院 华南农业大学动物科学学院 华南农业大学动物科学学院 中山大学生命科学学院 华南农业大学动物科学学院
Display of nonstructural gene 3D of foot and mouth disease virus on head surface of T4 bacteriophage
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输出: BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 本文通过PCR技术获得3D基因,使用拼接重叠延伸聚合酶链反应对3D基因内部的EcoRⅠ位点进行定点突变,将突变后的3D基因克隆至原核表达质粒pSOC和T4噬菌体的穿梭质粒pR中,通过PCR及质粒酶切鉴定,分别获得阳性重组子pSOC-3D和pR-3D。将含有3D基因的重组质粒pSOC-3D质粒转化大肠杆菌BL21进行表达,SDS-PAGE检测表达产物。将含有3D基因的重组质粒pR-3D转化T4噬菌体的宿主菌E2,通过同源重组获得重组噬菌体T4-3D,经SDS-PAGE及Western- blot检测,证明展示在T4噬菌体表面的3D融合蛋白能与FMDV感染血清发生特异性反应。
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覃健萍徐维加陈峰马静云谢青梅姚兵华曹永长毕英佐
关键词 口蹄疫病毒非结构蛋白3DT4噬菌体展示    
Abstract:The nonstructural gene 3D of foot-and-mouth disease virus was amplified by polymerase chain reaction (PCR) from the recombinant plasmids T-3D. A point mutation was conducted at the EcoRⅠrestriction site of 3D gene by means of spliced ovelapping extension PCR. The mutated 3D gene was inserted into the pSOC expression plasmid and the T4 bacteriophage recombinant integration plasmids pR to obtain the recombinant plasmids pSOC-3D and pR-3D. The recombinant plasmids were selected and confirmed by PCR screening and EcoRⅠrestriction endonuclease digestion. The expression plasmid pSOC-3D was used to transform E. coli BL21 and the expression product was analyzed by SDS-PAGE. The recombinant integration plasmid pR-3D was transinfected E.coli E2 strain to obtain the recombinant phages T4-3D, and the protein bands could detected by SDS-PAGE and reacted specifically to serum from FMDV-infected animals.
Key wordsFoot and mouth disease virus    Nonstructural protein 3D    T4 bacteriophage display
收稿日期: 2007-05-10     
通讯作者: 毕英佐   
引用本文:   
覃健萍 徐维加 陈峰 马静云 谢青梅 姚兵华 曹永长 毕英佐. 口蹄疫病毒3D蛋白在T4噬菌体衣壳表面的展示[J]. , 2008, 16(2): 0-.
. Display of nonstructural gene 3D of foot and mouth disease virus on head surface of T4 bacteriophage. , 2008, 16(2): 0-.
链接本文:  
http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/      或     http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/Y2008/V16/I2/0
 
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