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2025年4月3日 星期四
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含禽源启动子的禽流感病毒核蛋白表达载体的构建及其免疫原性的检测
王群;刘光亮;肖一红;童铁钢;白宇;张维军;徐树兰;吴东来
农业部兽医公共卫生重点开放实验室, 兽医生物技术国家重点实验室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所, 哈尔滨 150001
Construction of a Recombinant Vector Expressing Avian influenza virus
Nucleoprotein with an Avian-derived Promoter and Detection of Its Immunogenicity
全文: PDF (0 KB)  HTML (1 KB) 
输出: BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 为了研究禽流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)在鸡体内所引起的免疫反应,将其NP基因从重组质粒pVAX-NP上酶切后亚克隆至含禽源启动子的真核表达载体pCAGGS中,经筛选鉴定后获得重组子pCAGGS-NP,将鉴定正确的阳性重组子体外转染真核细胞,利用间接免疫荧光法检测目的基因的瞬时表达;采用腿部肌肉注射途径将重组子免疫SPF鸡,利用ELISA检测免疫后血清抗NP蛋白抗体效价。结果表明,该重组子无论在体外还是体内均能正确表达禽流感NP蛋白,且所表达的蛋白均具有良好的免疫原性。
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王群
刘光亮
肖一红
童铁钢
白宇
张维军
徐树兰
吴东来
关键词 禽流感核蛋白真核表达载体血清抗体    
AbstractIn order to investigate the immune responses to the nucleoprotein (NP) of Avian influenza virus, NP gene cut from recombinant plasmid pVAX-NP was subcloned into a eukaryotic expression vector pCAGGS with an avian-derived promoter. The recombinant plasmid pCAGGS-NP was obtained after PCR identification and sequencing. Then the positive pCAGGS-NP was subjected to transfect eukaryocyte and to immunize SPF chickens. Indirect florescent assay (IFA) was engaged to detect the transient expression of NP, and ELISA was used to detect the serum antibody of the immunized chickens which was against to NP protein. These results showed that NP was successfully expressed both in vitro and in vivo and had good immunoreactivity.
Key wordsAvian influenza virus (AIV)    nucleoprotein    eukaryotic expression vector    serum antibody
收稿日期: 2008-05-03     
通讯作者: 吴东来

吴东来

   
引用本文:   
王群;刘光亮;肖一红;童铁钢;白宇;张维军;徐树兰;吴东来. 含禽源启动子的禽流感病毒核蛋白表达载体的构建及其免疫原性的检测[J]. , 2009, 17(1): 7-11.
链接本文:  
http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/      或     http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/Y2009/V17/I1/7
 
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