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2025年8月21日 星期四
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应用酵母双杂交系统筛选与CASTOR相互作用的蛋白
杨绮
华中农业大学微生物学国家重点实验室
Screening and identification of proteins interacting with CASTOR by yeast two-hybrid system
全文: PDF (0 KB)  HTML (1 KB) 
输出: BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 CASTOR编码百脉根中的离子通道蛋白,它是共生途径上的功能基因,作用于结瘤因子诱导产生的钙离子激增(calcium spiking)信号转导途径的上游,突变后不能形成根瘤。为了进一步揭示CASTOR调控共生信号途径的分子机制,本文通过酵母双杂交系统在百脉根的cDNA文库中筛选可能与CASTOR相互作用的蛋白,以酵母配合的方法初筛获得111个阳性克隆,经β- Gal检测进一步确认有99个蓝色克隆子,测序以及NCBI BLAST比对分析鉴定出JAB1、CLPA、钙调素结合的翻译延伸因子等7种可能与CASTOR相互作用的蛋白,利用RT-PCR方法检测了这些基因在接种以及不接种根瘤菌的百脉根中的表达水平,分析推测CASTOR可能与上述蛋白形成复合物参与共生信号的转导。
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杨绮
关键词 百脉根CASTOR酵母双杂交    
Abstract:CASTOR encoded predictable ion channel protein in Lotus japonicus ,which was the functional gene in the pathway of symbiosis, acted upstream of intracellular calcium spiking, mutants affected in CASTOR gene didn’t form root nodules. To research the proteins interacting with CASTOR, the CASTOR gene was used as the bait protein to mate with the cDNA lib of Lotus japonicus by yeast two-hybrid system. It had 111 positive clones in prescreening, it had 99 blue clones by thorough detection of β- Gal, there may be seven species proteins interacting with CASTOR after sequencing and NCBI blast analysis, then identified the expression of these genes in Lotus japonicus by RT-PCR, it was predicted that CASTOR may form compound with these proteins to thansfer symbiosis signal.
Key wordsLotus japonicus    CASTOR    yeast two-hybrid system
收稿日期: 2007-03-20     
通讯作者: 杨绮   
引用本文:   
杨绮. 应用酵母双杂交系统筛选与CASTOR相互作用的蛋白[J]. , 2007, 15(6): 0-.
链接本文:  
http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/      或     http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/Y2007/V15/I6/0
 
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