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2025年8月1日 星期五
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利用免疫共沉淀技术研究RSV CP、SP和NSvc4三个蛋白的互作情况
鹿连明 秦梅玲 王萍 兰汉红 牛晓庆 谢荔岩 吴祖建 谢联辉
福建农林大学植物病毒研究所 福建农林大学植物病毒研究所 福建农林大学植物病毒研究所 福建农林大学植物病毒研究所 福建农林大学植物病毒研究所 福建农林大学植物病毒研究所 福建农林大学植物病毒研究所 福建农林大学植物病毒研究所
Studies on the Interactions between RSV CP、SP and NSvc4 Proteins by Using Co-immunoprecipitation Technology
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输出: BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 为了检测水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV)CP、SP和NSvc4蛋白自身和两两之间的互作关系,首先通过PCR扩增获得了分别融合有HA或c-Myc标签的RSV CP、SP和NSvc4基因,并将其插入到植物表达载体pEGAD或pKYLX71:35S2中。重组质粒转化农杆菌EHA105后,将含有不同重组质粒的农杆菌菌液混合后注射烟草(Nicotiana benthamiana)叶片。提取烟草中瞬时表达的蛋白,以HA抗体或c-Myc抗体进行免疫共沉淀实验,最后免疫混合物通过c-Myc抗体或HA抗体进行Western blot检测,确定蛋白的互作情况。结果表明,RSV CP蛋白自身能够发生互作,而CP与SP,CP与NSvc4,SP与SP,SP与NSvc4,及NSvc4与NSvc4蛋白之间均未有检测到互作现象。
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鹿连明秦梅玲王萍兰汉红牛晓庆谢荔岩吴祖建谢联辉
关键词 水稻条纹病毒免疫共沉淀蛋白互作    
Abstract:In order to detect the interaction between Rice stripe virus (RSV) CP, SP and NSvc4, the HA-tagged or c-Myc-tagged CP, SP and NSvc4 of RSV were amplified by PCR, and then inserted into plant expression vector pEGAD or pKYLX71:35S2. The recombinant plasmids were transformed into Agrobacterium tumefaciens EHA105, and the EHA105 containing different recombinant was injected into Nicotiana benthamiana. The total proteins were isolated from Agrobacterium-infiltrated N. benthamiana leaves, and co-immunoprecipitated with HA or c-Myc antibody. The immunocomplexes were detected by Western blot with c-Myc or HA antibody to identify the interaction between these proteins. The results showed that RSV CP can interact with itself, but no interaction between other proteins was detected.
Key wordsRice stripe virus    co-immunoprecipitation    protein interaction
收稿日期: 2008-01-23     
通讯作者: 吴祖建   
引用本文:   
鹿连明 秦梅玲 王萍 兰汉红 牛晓庆 谢荔岩 吴祖建 谢联辉. 利用免疫共沉淀技术研究RSV CP、SP和NSvc4三个蛋白的互作情况[J]. , 2008, 16(5): 0-.
. Studies on the Interactions between RSV CP、SP and NSvc4 Proteins by Using Co-immunoprecipitation Technology. , 2008, 16(5): 0-.
链接本文:  
http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/      或     http://journal05.magtech.org.cn/Jwk_ny/CN/Y2008/V16/I5/0
 
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