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| 欧文氏杆菌木聚糖酶的纯化与酶学性质研究 |
| 徐君飞 |
| 中国农业科学院麻类研究所 |
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| 欧文氏杆菌木聚糖酶的纯化与酶学性质研究 |
| Xu Junfei |
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摘要 从实验室现有菌种资源中筛选出木聚糖酶高产菌株，发酵液酶活达到408 U；仅采用超滤和凝胶层析2个步骤即从发酵液中提取到电泳纯木聚糖酶，回收率高达69.17 %，比活达到28453.6 U/mg；用ESI-MS/MS法测得该酶氨基酸序列，与该研究室登陆GenBank的木聚糖酶基因表达的氨基酸序列一致；其酶学性质为：采用SDS-PAGE和凝胶层析测得分子量为22.54 kD、21.89 kD；IEF-PAGE测得等电点为9.63；以桦木木聚糖为底物时，Km值和Vmax分别为1.0mg/ml和33.3μmol/（min.ml），燕麦木聚糖的Km值和Vmax分别为0.5mg/ml和33.3μmol/（min.ml）；最适作用温度60℃，稳定温度0℃~60℃；最适pH5.8，稳定pH3.4~6.4；Fe2+、Co2+有激活作用，Cu2+有强烈抑制作用。
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| 关键词 ：
菌株筛选,
木聚糖酶,
纯化,
酶学性质
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| Abstract：从实验室现有菌种资源中筛选出木聚糖酶高产菌株，发酵液酶活达到408U/ml；仅采用超滤和凝胶层析2个步骤即从发酵液中提取到电泳纯木聚糖酶，回收率高达69.17%，比活达到28453.6U/mg；用ESI-MS/MS法测得该酶氨基酸序列，与该研究室登陆GenBank的木聚糖酶基因表达的氨基酸序列一致；其酶学性质为：采用SDS-PAGE和凝胶层析测得分子量为22.54 kD、21.89 kD；IEF-PAGE测得等电点为9.63；以桦木木聚糖为底物时，Km值和Vmax分别为1.0mg/ml和33.3μmol/（min.ml），燕麦木聚糖的Km值和Vmax分别为0.5 mg/ml和33.3μmol/（min.ml）；最适作用温度60℃，稳定温度0℃~60℃；最适pH5.8，稳定pH3.4~6.4；Fe2+、Co2+有激活作用，Cu2+有强烈抑制作用。 |
| Key words：
菌株筛选
木聚糖酶
纯化
酶学性质
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收稿日期: 2008-12-23
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通讯作者:
徐君飞
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